Protokół cytospinowy
Cytospinowanie jest metodą stosowaną przez mikrobiologów w celu przygotowania komórek do oglądania pod mikroskopem. Protokół cytospinowy to standaryzacja krok po kroku procedur cytospinowania, która jest częścią procesu badań biologicznych i medycznych na całym świecie.
1Przygotowanie cytospin
Najpierw należy rozcieńczyć komórki za pomocą soli fizjologicznej buforowanej fosforanami (PBS) lub roztworu soli fizjologicznej, około 500 mililitrów roztworu na każde 25 000 komórek. Następnie należy przygotować wirówkę, wkładając, uszczelniając i zaciskając szkiełka, tak aby były skierowane na zewnątrz, a nie do wewnątrz.
2Działanie cytospinowe
Następnie należy załadować komórki i wirować je z prędkością 10 przez cztery minuty lub 13 przez sześć minut w przypadku mniejszych komórek. Po usunięciu roztworu soli fizjologicznej z każdego szkiełka, dodaj taką samą ilość 4 procent sproszkowanego popiołu paliwowego (PFA), środka konserwującego, aby zachować komórki. Następnie powtórz cykl wirowania.
- Cytospinowanie jest metodą używaną przez mikrobiologów do przygotowania komórek do oglądania pod mikroskopem.
- Po usunięciu roztworu soli z każdego szkiełka dodaj taką samą ilość 4-procentowego sproszkowanego popiołu paliwowego (PFA), środka konserwującego, aby zachować komórki.
Cytospin Cleanup
Następnie przemyj każde szkiełko dwukrotnie roztworem soli. Użyj specjalnego pióra zwanego "pap pen", aby zrobić kwadraty wokół komórek. Na koniec, nawilż komórki roztworem soli fizjologicznej i pozostaw w komorze wilgotnościowej w temperaturze 4 stopni Celsjusza, aż będą potrzebne.